Вы вошли как Гость Текущая дата: Пятница, 2024-03-29, 3:17 PM
Красители для гистологии
|
|
Maxim | Дата: Суббота, 2013-09-14, 10:32 AM | Сообщение # 31 |
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 555
Статус: Offline
| Ваши лаборанты и врачи молодцы. Но выявление бацилл - это очень грустно и страшно. Ведь при обнаружении туберкулезного процесса впервые при вскрытии мы подаем экстренное извещение в росздравнадзор и потом соответствующие службы занимаются обследованием живых родственников и эпидемиологической обстановки. Руки и глаза при любом гистохимическом методе играют важную роль. Также важны красители. У меня есть вопросы: 1. В бюро коллеги использовали тоже набор Bio-Optica и ничего не нашли? 2. А может, поленились поискать под иммерсией? 3. Вы смотрели их препараты? 4. Они прообовали красить вашим набором?
|
|
| |
Vladpatholog | Дата: Суббота, 2013-09-14, 1:12 PM | Сообщение # 32 |
Генерал-лейтенант
Группа: Администраторы
Сообщений: 638
Статус: Offline
| Коллега, а не могли бы вы для нас сделать фотографию результата окраски? Фотография станет украшением галереи сайта. У вас потрясающие результаты выявления микобактерий туберкулеза. Вы всегда пользовались реагентами Bio-Optica? Ведь они сравнительно недавно появились на отечественном рынке и большинство лабораторий красили собственного приготовления реагентами. И быть может столь впечатляющие результаты получены в связи с особенностями гистологической проводки? Какая у вас? С уважением.
|
|
| |
nastja | Дата: Вторник, 2014-01-21, 1:18 PM | Сообщение # 33 |
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Статус: Offline
| Maxim, добрый день! Подскажите, пожалуйста, для окраски на фибрин подойдет обычная пропись по Граму?
|
|
| |
Maxim | Дата: Вторник, 2014-01-21, 9:20 PM | Сообщение # 34 |
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 555
Статус: Offline
| Nastia, окраска по Граму для гистологических срезов отличается от бактериологического аналога тем, что перед окраской срезы нужно депарафинировать, затем покрасить, и потом обезводить, просветлить и заключить. Красители, иод Люголя и спирт можно использовать из бактериологической лаборатории - их прописи не отличаются никак. Мне больше нравится работать с генциановым фиолетовым и нейтральным красным (он еще и ядра красиво окрашивает - сафранин уступает сильно). Для дифференцировки использую этанол. Не рекомендую использовать анилин-ксилол, ацетон-лимонен и прочую отраву - они работают ничуть не лучше обычного этанола - поверьте, пробовал сам много раз, и от них отказался очень давно. Фибрин окрашивается в синий цвет. Но это только старый фибрин. Иногда не все фибириновые нити окрашены в синий цвет. Возраст фибрина при этом определить нельзя. Зато некоторые грибы и многие бактерии, включая микобактерии, окрашиваются на ура. Также хорошо окрашивается кератин.
|
|
| |
nastja | Дата: Среда, 2014-01-22, 1:05 AM | Сообщение # 35 |
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Статус: Offline
| Maxim, спасибо. То, что можно дифференцировать этанолом для нас очень хорошо. Насколько старый должен быть фибрин? Я хотела бы покрасить легкие, чтобы проверить себя в распознавании гиалиновых мембран. Заметила, что при отеке легких очень часто вдоль межальвеолярных перегородок есть розовое гомогенное вещество. Сомневаюсь, что каждый раз это гиалиновые мембраны поэтому ищу варианты окраски.
|
|
| |
Maxim | Дата: Среда, 2014-01-22, 9:44 PM | Сообщение # 36 |
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 555
Статус: Offline
| Nastja, чтобы рассеять большинство сомнений, достаточно качественной окраски гематоксилином и эозином (гиалин гомогенно розовый, но не очень яркий), а также по Ван Гизон (гиалин ярко-малиновый, а амилоид коричнево-желтый). Обратите внимание на книгу Stacey Mills 2007 (3 Ed). Там хорошо описано очень много подводных каменй, которые поджидают патолога на каждом повороте. Фибрин, который окрашивается по Граму в синий цвет обычно старше недели.
|
|
| |
nastja | Дата: Пятница, 2014-02-14, 1:31 AM | Сообщение # 37 |
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Статус: Offline
| Maxim, спасибо. Книгу нашла, разбираюсь с поиском. Добавлено (2014-02-14, 1:31 AM) --------------------------------------------- Добрый вечер! У меня такой вопрос: могут ли соли кальция при минерализации тканей окрашиваться оксифильно ? (гематоксилин/эозин)
|
|
| |
Maxim | Дата: Пятница, 2014-02-14, 2:21 PM | Сообщение # 38 |
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 555
Статус: Offline
| Nastja, отложения кальция в окраске ГЭ всегда окрашиваются в черно-синий или темно-фиолетовый цвет гематоксилином (зависит от типа) и никогда эозином.
|
|
| |
nastja | Дата: Четверг, 2014-05-29, 7:52 AM | Сообщение # 39 |
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Статус: Offline
| Вопрос по ШИК. При окраске срезов печени оказалось, что центр препарата не окрашивается, ближе к периферии в гепатоцитах появляются положительно окрашивающиеся гранулы, край препарата весь малиновый. Это артефакт?
|
|
| |
Maxim | Дата: Четверг, 2014-05-29, 1:58 PM | Сообщение # 40 |
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 555
Статус: Offline
| Nastja! Формалин очень плохо сохраняет гликоген или вовсе его не сохраняет. Здесь как раз и проиллюстрировано вымывание гликогена на периферию. В центр, вероятнее всего, формалин даже не попал в достаточном количестве. Если потребуется выявление гликогена, лучше воспользоваться фиксаторами, содержащими спирт. Вариантов масса.
|
|
| |
nastja | Дата: Суббота, 2014-05-31, 10:36 AM | Сообщение # 41 |
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Статус: Offline
| Maxim, спасибо. Т.е. гликоген в центре препарата распался уже посмертно? Мы искали криптококки по всем органам и такая окраска гликогена обнаружилась случайно.
|
|
| |
Maxim | Дата: Суббота, 2014-05-31, 11:35 AM | Сообщение # 42 |
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 555
Статус: Offline
| Nastja, строго говоря, все, с чем мы имеем дело гистлогически так или иначе посмертное, вопрос сколько времени прошло. Гликоген плохо сохраняется формалином в любом материале. В коже можно видеть даже направленную диффузию в клетках плоского эпителия (от базальной мембраны к периферии): апикальные полюсы эпителиальных клеток с гликогеном, а середина и базальные части нет. Cryptococcus neoformans представляет собой почкующиеся дрожжевые клетки с тонкими стенками, 2-20 микрон в диаметре. Окрашивается муцикармином, по Граму, альциановым синим + ШИК, GMS, по Гридли (грибы), коллоидным железом. Я видел фотки криптококков, которые Вы сделали, очень похожи. Но меня смущает отсутствие реакции тканей на них. Либо это носительство, но тогда бы Вы и не подозревали об их наличии, либо это не они - Вы ведь искали их не просто так? Подкрепитесь другими окрасками, если есть возможность.
|
|
| |
Ирина5019 | Дата: Четверг, 2014-07-31, 9:06 AM | Сообщение # 43 |
Рядовой
Группа: Пользователи
Сообщений: 3
Статус: Offline
| Уважаемые коллеги, образец, окрашенный крезилвиолетом, перевезли из Сочи в Москву - прошло недели две после его окраски - и он ПОЗЕЛЕНЕЛ. По выражению лаборанта - обесцветился.
Никто не сталкивался с подобным? Порылась в Интернете - о причинах изменения цвета крезилвиолета ничего не нашла
|
|
| |
Maxim | Дата: Четверг, 2014-07-31, 9:39 PM | Сообщение # 44 |
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 555
Статус: Offline
| Ирина, чтобы ответить на вопрос, мне не хватает некоторых деталей: Какой метод окраски Вы использовали (чей набор)? Какой объект окрашивали? Толщина среза?
Крезиловый фиолетовый - это оксазиновый краситель. Его основной спектральный цвет - фиолетовый, но он может давать метахроматическое окрашивание красного цвета. Зелень - никогда. Обычно он используется для окраски вещества Ниссля или сам по себе (тогда вообще не должен зеленеть) или как докраска ядер нервных клеток в методе Kluwer-Barrera для миелина. В этом методе люсколовый прочный синий окрашивает миелин в голубовато-зеленый цвет и это совершенно нормально. Крезиловый прочный фиолетовый никогда не обесцвечивается.
|
|
| |
Ирина5019 | Дата: Пятница, 2014-08-01, 9:47 AM | Сообщение # 45 |
Рядовой
Группа: Пользователи
Сообщений: 3
Статус: Offline
| Максим, я сразу напишу, как только узнаю (я в этом не участвовала, поэтому не знаю). Большое спасибо! Добавлено (2014-08-01, 9:47 AM) --------------------------------------------- Максим,
окрашивали образцы из головного мозга по методу Ниссля, при этом окрашивали только крезиловым фиолетовым (без тионина). Толщина среза была 4 мкм. Больше узнать не удалось.
После окраски проверили под микроскопом - все идеально. Потом она увезла стекла к себе в Москву и через некоторое время образцы позеленели-обесцветились. Она говорит, что тоже ВПЕРВЫЕ такое видит, так как даже стекла 20-летней давности не теряют окраски.
|
|
| |
|
|