Красители для гистологии - Страница 3 - Форум
 
Красители для гистологии - Страница 3 - Форум
[ Новые сообщения · Участники · Правила форума · Поиск · RSS ]
Вы вошли как Гость
Текущая дата: Пятница, 2016-12-09, 10:43 AM

Страница 3 из 5«12345»
Форум » ОПЕРАЦИОННЫЙ МАТЕРИАЛ » Методики » Красители для гистологии (вопросы гистохимических окрасок)
Красители для гистологии
MaximДата: Суббота, 2013-09-14, 10:32 AM | Сообщение # 31
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 478
Репутация: 25
Статус: Offline
Ваши лаборанты и врачи молодцы. Но выявление бацилл - это очень грустно и страшно. Ведь при обнаружении туберкулезного процесса впервые при вскрытии мы подаем экстренное извещение в росздравнадзор и потом соответствующие службы занимаются обследованием живых родственников и эпидемиологической обстановки.
Руки и глаза при любом гистохимическом методе играют важную роль. Также важны красители.
У меня есть вопросы:
1. В бюро коллеги использовали тоже набор Bio-Optica и ничего не нашли?
2. А может, поленились поискать под иммерсией?
3. Вы смотрели их препараты?
4. Они прообовали красить вашим набором?
 
VladpathologДата: Суббота, 2013-09-14, 1:12 PM | Сообщение # 32
Генерал-лейтенант
Группа: Администраторы
Сообщений: 638
Репутация: 13
Статус: Offline
Коллега, а не могли бы вы для нас сделать фотографию результата окраски? Фотография станет украшением галереи сайта.
У вас потрясающие результаты выявления микобактерий туберкулеза. Вы всегда пользовались реагентами Bio-Optica? Ведь они сравнительно недавно появились на отечественном рынке и большинство лабораторий красили собственного приготовления реагентами.
И быть может столь впечатляющие результаты получены в связи с особенностями гистологической проводки? Какая у вас?
С уважением.
 
nastjaДата: Вторник, 2014-01-21, 1:18 PM | Сообщение # 33
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Репутация: 6
Статус: Offline
Maxim, добрый день!
Подскажите, пожалуйста, для окраски на фибрин подойдет обычная пропись по Граму?
 
MaximДата: Вторник, 2014-01-21, 9:20 PM | Сообщение # 34
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 478
Репутация: 25
Статус: Offline
Nastia, окраска по Граму для гистологических срезов отличается от бактериологического аналога тем, что перед окраской срезы нужно депарафинировать, затем покрасить, и потом обезводить, просветлить и заключить. Красители, иод Люголя и спирт можно использовать из бактериологической лаборатории - их прописи не отличаются никак.
Мне больше нравится работать с генциановым фиолетовым и нейтральным красным (он еще и ядра красиво окрашивает - сафранин уступает сильно). Для дифференцировки использую этанол. Не рекомендую использовать анилин-ксилол, ацетон-лимонен и прочую отраву - они работают ничуть не лучше обычного этанола - поверьте, пробовал сам много раз, и от них отказался очень давно.
Фибрин окрашивается в синий цвет. Но это только старый фибрин. Иногда не все фибириновые нити окрашены в синий цвет. Возраст фибрина при этом определить нельзя. Зато некоторые грибы и многие бактерии, включая микобактерии, окрашиваются на ура. Также хорошо окрашивается кератин.
 
nastjaДата: Среда, 2014-01-22, 1:05 AM | Сообщение # 35
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Репутация: 6
Статус: Offline
Maxim, спасибо. То, что можно дифференцировать этанолом для нас очень хорошо. Насколько старый должен быть фибрин? Я хотела бы покрасить легкие, чтобы проверить себя в распознавании гиалиновых мембран. Заметила, что при отеке легких очень часто вдоль межальвеолярных перегородок есть розовое гомогенное вещество. Сомневаюсь, что каждый раз это гиалиновые мембраны поэтому ищу варианты окраски.
 
MaximДата: Среда, 2014-01-22, 9:44 PM | Сообщение # 36
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 478
Репутация: 25
Статус: Offline
Nastja, чтобы рассеять большинство сомнений, достаточно качественной окраски гематоксилином и эозином (гиалин гомогенно розовый, но не очень яркий), а также по Ван Гизон (гиалин ярко-малиновый, а амилоид коричнево-желтый). Обратите внимание на книгу Stacey Mills 2007 (3 Ed). Там хорошо описано очень много подводных каменй, которые поджидают патолога на каждом повороте.
Фибрин, который окрашивается по Граму в синий цвет обычно старше недели.
 
nastjaДата: Пятница, 2014-02-14, 1:31 AM | Сообщение # 37
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Репутация: 6
Статус: Offline
Maxim, спасибо. Книгу нашла, разбираюсь с поиском.

Добавлено (2014-02-14, 1:31 AM)
---------------------------------------------
Добрый вечер!
У меня такой вопрос: могут ли соли кальция  при минерализации тканей окрашиваться оксифильно ? (гематоксилин/эозин)

 
MaximДата: Пятница, 2014-02-14, 2:21 PM | Сообщение # 38
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 478
Репутация: 25
Статус: Offline
Nastja, отложения кальция в окраске ГЭ всегда окрашиваются в черно-синий или темно-фиолетовый цвет гематоксилином (зависит от типа) и никогда эозином.
 
nastjaДата: Четверг, 2014-05-29, 7:52 AM | Сообщение # 39
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Репутация: 6
Статус: Offline
Вопрос по ШИК. При окраске срезов печени оказалось, что центр препарата не окрашивается, ближе к периферии в гепатоцитах появляются положительно окрашивающиеся гранулы, край препарата весь малиновый. Это артефакт?
Прикрепления: 7462313.jpg(260Kb) · 3336097.jpg(263Kb) · 0696025.jpg(269Kb)
 
MaximДата: Четверг, 2014-05-29, 1:58 PM | Сообщение # 40
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 478
Репутация: 25
Статус: Offline
Nastja! Формалин очень плохо сохраняет гликоген или вовсе его не сохраняет. Здесь как раз и проиллюстрировано вымывание гликогена на периферию. В центр, вероятнее всего, формалин даже не попал в достаточном количестве.
Если потребуется выявление гликогена, лучше воспользоваться фиксаторами, содержащими спирт. Вариантов масса.
 
nastjaДата: Суббота, 2014-05-31, 10:36 AM | Сообщение # 41
Подполковник
Группа: Патоморфологи
Сообщений: 64
Репутация: 6
Статус: Offline
Maxim, спасибо. Т.е. гликоген в центре препарата распался уже посмертно? 
Мы искали криптококки по всем органам и такая окраска гликогена обнаружилась случайно.
 
MaximДата: Суббота, 2014-05-31, 11:35 AM | Сообщение # 42
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 478
Репутация: 25
Статус: Offline
Nastja, строго говоря, все, с чем мы имеем дело гистлогически так или иначе посмертное, вопрос сколько времени прошло.
Гликоген плохо сохраняется формалином в любом материале.
В коже можно видеть даже направленную диффузию в клетках плоского эпителия (от базальной мембраны к периферии): апикальные полюсы эпителиальных клеток с гликогеном, а середина и базальные части нет.
Cryptococcus neoformans представляет собой почкующиеся дрожжевые клетки с тонкими стенками, 2-20 микрон в диаметре. Окрашивается муцикармином, по Граму, альциановым синим + ШИК, GMS, по Гридли (грибы), коллоидным железом.
Я видел фотки криптококков, которые Вы сделали, очень похожи. Но меня смущает отсутствие реакции тканей на них. Либо это носительство, но тогда бы Вы и не подозревали об их наличии, либо это не они - Вы ведь искали их не просто так?
Подкрепитесь другими окрасками, если есть возможность.
 
Ирина5019Дата: Четверг, 2014-07-31, 9:06 AM | Сообщение # 43
Рядовой
Группа: Пользователи
Сообщений: 3
Репутация: 0
Статус: Offline
Уважаемые коллеги,  образец, окрашенный крезилвиолетом, перевезли из Сочи в Москву - прошло недели две после его окраски -  и он ПОЗЕЛЕНЕЛ.  По выражению лаборанта - обесцветился.

Никто не сталкивался с подобным? Порылась в Интернете - о причинах изменения цвета крезилвиолета ничего не нашла
 
MaximДата: Четверг, 2014-07-31, 9:39 PM | Сообщение # 44
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 478
Репутация: 25
Статус: Offline
Ирина, чтобы ответить на вопрос, мне не хватает некоторых деталей:
Какой метод окраски Вы использовали (чей набор)?
Какой объект окрашивали?
Толщина среза?

Крезиловый фиолетовый - это оксазиновый краситель. Его основной спектральный цвет - фиолетовый, но он может давать метахроматическое окрашивание красного цвета. Зелень - никогда. Обычно он используется для окраски вещества Ниссля или сам по себе (тогда вообще не должен зеленеть) или как докраска ядер нервных клеток в методе Kluwer-Barrera для миелина. В этом методе люсколовый прочный синий окрашивает миелин в голубовато-зеленый цвет и это совершенно нормально.
Крезиловый прочный фиолетовый никогда не обесцвечивается.
 
Ирина5019Дата: Пятница, 2014-08-01, 9:47 AM | Сообщение # 45
Рядовой
Группа: Пользователи
Сообщений: 3
Репутация: 0
Статус: Offline
Максим,   я сразу напишу, как только узнаю (я в этом не участвовала, поэтому не знаю). Большое спасибо!

Добавлено (2014-08-01, 9:47 AM)
---------------------------------------------
Максим,

окрашивали образцы из головного мозга  по методу Ниссля,  при этом окрашивали только крезиловым фиолетовым (без тионина). Толщина среза была 4 мкм.  Больше узнать не удалось.

После окраски проверили под микроскопом - все идеально.  Потом она увезла стекла к себе в Москву и через некоторое время образцы позеленели-обесцветились. Она говорит, что тоже ВПЕРВЫЕ такое видит, так как даже стекла 20-летней давности не теряют окраски.

 
Форум » ОПЕРАЦИОННЫЙ МАТЕРИАЛ » Методики » Красители для гистологии (вопросы гистохимических окрасок)
Страница 3 из 5«12345»
Поиск: