| Nadya | Дата: Суббота, 2011-11-12, 2:41 PM | Сообщение # 1 |
|
Рядовой
Группа: Пользователи
Сообщений: 1
Статус: Offline
| Уважаемые, коллеги!
Подскажите, от чего зависит окраска ядерных антител, а именно ее отсутствие( ki-67, bcl-6, myogenin ). У нас в работе ничего не изменилось, может все зависит от проводки материала? Мы демаскируем антитела, проверяя каждый раз буфер, ставим водяную баню на 30 минут, температура 97С, работаем с DAKO.... Можно ли увеличить время демаскировки до 40 минут, если все дело в фиксации, просто как можно открыть антиген, чтобы произошла реакция? ЕЩЕ одно наблюдение, летом было все нормально, и у нас сейчас работает кондиционер, температуру в комнате поддерживаем.
|
| |
| |
| Maxim | Дата: Суббота, 2011-11-12, 6:56 PM | Сообщение # 2 |
|
Профессионал
Группа: Модераторы
Сообщений: 555
Статус: Offline
| Уважаемая Nadya,
Начните с фиксации. Убедитесь, что клиницисты, посылающие Вам материал помещают его сразу в нейтральный забуференный формалин. После получения макропрепарата в лаборатории и вырезки еще нужно минимум 24 часа в свежей порции нейтрального забуференного формалина подержать кусочки, поскольку кусочек может быть взят изнутри, куда даже за 3 суток в маропрепарате не проник формалин. Толщина кусочка на вырезке должна быть не более 3 мм, 24 часа, нейтральный забуференный формалин и объем его в 20 раз больше кусочка. Любые отступления от этих правил ИГХ не прощает.
Vimentin и Ki-67 - лучшие индикаторов качества фиксации.
Проверьте, не поменялись ли медсестры и санитарки в хирургическом отделении, отвечающие за помещение матерала в фиксатор. (Когда онаружите причину неудач - поедилитесь, просто интересно).
Все остальные действия нужно предпринимать поэтапно, делая изменения по однму и поочередно. Модифицировать протокол нужно в последнюю очередь, особенно Dako.
У нас тоже бывает гадкий Ki67 в радикальных мастэктомях после лучевой и химиотерапии. С одной сторонны невозможность определить Ki67 после таких вмешательств - хороший знак для клинициста, но ужасный знак для пациента, если ИГХ не была сделана ранее, поскольку достоверность ИГХ-результатов в этом случае очень сомнительна.
|
| |
| |
