Фиксация органов в жидком азоте
|
|
Pavel | Дата: Среда, 2009-06-10, 10:24 PM | Сообщение # 1 |
3
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Статус: Offline
| Подскажите, пожалуйста, как правильно проводить заморозку органов в жидком азоте в сосуде Дьюара для иммуногистохимических исследований. Аппарата для програмной заморозки нет. Спасибо заранее.
|
|
| |
Patologoanatom | Дата: Среда, 2009-06-10, 11:52 PM | Сообщение # 2 |
 ___
Группа: Администраторы
Сообщений: 755
Статус: Offline
| Образцы маркируются, заворачиваются в фольгу, помещаются в емкость. В лаборатории применяется криостат.
|
|
| |
Pavel | Дата: Среда, 2009-06-10, 11:53 PM | Сообщение # 3 |
3
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Статус: Offline
| Спасибо большое. А как правильно разморозить органы для нарезки?
|
|
| |
Patologoanatom | Дата: Среда, 2009-06-10, 11:55 PM | Сообщение # 4 |
 ___
Группа: Администраторы
Сообщений: 755
Статус: Offline
| Залить в O.C.T.
|
|
| |
Pavel | Дата: Среда, 2009-06-10, 11:57 PM | Сообщение # 5 |
3
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Статус: Offline
| можно ли для заморозки помещать образцы органов в криопробирки? Добавлено (2009-06-10, 11:57 Pm) --------------------------------------------- а как расшифровывается О.С.Т.
|
|
| |
Patologoanatom | Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:03 AM | Сообщение # 6 |
 ___
Группа: Администраторы
Сообщений: 755
Статус: Offline
| Quote (Pavel) можно ли для заморозки помещать образцы органов в криопробирки? Замучаетесь из пробирок выколупывать материал. Предпочтительнее заливать материал в пластиковые формочки в O.C.T. , чтобы быстрее заморозилось можно использовать криоспрей, а затем помещать в контейнер. Quote (Pavel) а как расшифровывается О.С.Т. O.C.T. (Optimal Cutting Temperature) Compound
|
|
| |
Pavel | Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:07 AM | Сообщение # 7 |
3
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Статус: Offline
| А можно ли помещать из жидкого азота органы сразу в криостат при -24? Не навредит ли это качеству срезов,не будет ли разрывов клеток и ядер?
|
|
| |
Patologoanatom | Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:15 AM | Сообщение # 8 |
 ___
Группа: Администраторы
Сообщений: 755
Статус: Offline
| Quote (Pavel) Не навредит ли это качеству срезов,не будет ли разрывов клеток и ядер? Может. Могут образоваться кристаллы льда, которые изменят морфологию. Вот поэтому лучше заливать материал в O.C.Т. сразу. O.C.Т. защищает ткань. После доставки материала, лучше его хранить на -80с.
|
|
| |
Pavel | Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:18 AM | Сообщение # 9 |
3
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Статус: Offline
| а если постепенно из жидкого азота в -80, а потом в -24 это тоже навредит?
|
|
| |
Patologoanatom | Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:45 AM | Сообщение # 10 |
 ___
Группа: Администраторы
Сообщений: 755
Статус: Offline
| Это лучшая опция.
|
|
| |
Pavel | Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:48 AM | Сообщение # 11 |
3
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Статус: Offline
| то есть можно не использовать Optimal Cutting Temperature Compound?
|
|
| |
Patologoanatom | Дата: Четверг, 2009-06-11, 1:23 AM | Сообщение # 12 |
 ___
Группа: Администраторы
Сообщений: 755
Статус: Offline
| Не знаю как можно получить качественные срезы, пригодные для ИГХ, на криостате без O.C.T.
|
|
| |
Pavel | Дата: Четверг, 2009-06-11, 11:20 AM | Сообщение # 13 |
3
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Статус: Offline
| Скажите, пожалуйста, 1. в каких объемах выпускается О.С.Т.? 2. На сколько образцов органов хватает одного флакона О.С.Т.? 3. Формочки для заливки органов в О.С.Т. специальные ? Как правильно заливать? 4. Приблизительная цена одной единицы О.С.Т.? 5. Есть ли особые требования к О.С.Т. при покупке? То есть это стандартный компонент для ИГХ или надо подбирать?Добавлено (2009-06-11, 7:54 Am) --------------------------------------------- Заливать органы О.С.Т. нужно сразу после того как вынимают из жидкого азота? Как правильно провести эту процедуру Спасибо Добавлено (2009-06-11, 11:20 Am) --------------------------------------------- Если можно, укажите, пожалуйста, О.С.Т. какого производителя можно купить
|
|
| |