Фиксация органов в жидком азоте - Форум
 
Фиксация органов в жидком азоте - Форум
[ Новые сообщения · Участники · Правила форума · Поиск · RSS ]
Вы вошли как Гость
Текущая дата: Пятница, 2016-12-09, 10:43 AM

Страница 1 из 11
Форум » ИММУНОГИСТОХИМИЯ » Технические вопросы » Фиксация органов в жидком азоте
Фиксация органов в жидком азоте
PavelДата: Среда, 2009-06-10, 10:24 PM | Сообщение # 1
Лейтенант
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Репутация: 0
Статус: Offline
Подскажите, пожалуйста, как правильно проводить заморозку органов в жидком азоте в сосуде Дьюара для иммуногистохимических исследований. Аппарата для програмной заморозки нет.
Спасибо заранее.
 
PatologoanatomДата: Среда, 2009-06-10, 11:52 PM | Сообщение # 2
___
Группа: Администраторы
Сообщений: 743
Репутация: 11
Статус: Offline
Образцы маркируются, заворачиваются в фольгу, помещаются в емкость. В лаборатории применяется криостат.
 
PavelДата: Среда, 2009-06-10, 11:53 PM | Сообщение # 3
Лейтенант
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Репутация: 0
Статус: Offline
Спасибо большое. А как правильно разморозить органы для нарезки?
 
PatologoanatomДата: Среда, 2009-06-10, 11:55 PM | Сообщение # 4
___
Группа: Администраторы
Сообщений: 743
Репутация: 11
Статус: Offline
Залить в O.C.T.
 
PavelДата: Среда, 2009-06-10, 11:57 PM | Сообщение # 5
Лейтенант
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Репутация: 0
Статус: Offline
можно ли для заморозки помещать образцы органов в криопробирки?

Добавлено (2009-06-10, 11:57 Pm)
---------------------------------------------
а как расшифровывается О.С.Т.

 
PatologoanatomДата: Четверг, 2009-06-11, 0:03 AM | Сообщение # 6
___
Группа: Администраторы
Сообщений: 743
Репутация: 11
Статус: Offline
Quote (Pavel)
можно ли для заморозки помещать образцы органов в криопробирки?

Замучаетесь из пробирок выколупывать материал. Предпочтительнее заливать материал в пластиковые формочки в O.C.T. , чтобы быстрее заморозилось можно использовать криоспрей, а затем помещать в контейнер.
Quote (Pavel)
а как расшифровывается О.С.Т.

O.C.T. (Optimal Cutting Temperature) Compound
 
PavelДата: Четверг, 2009-06-11, 0:07 AM | Сообщение # 7
Лейтенант
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Репутация: 0
Статус: Offline
А можно ли помещать из жидкого азота органы сразу в криостат при -24? Не навредит ли это качеству срезов,не будет ли разрывов клеток и ядер?
 
PatologoanatomДата: Четверг, 2009-06-11, 0:15 AM | Сообщение # 8
___
Группа: Администраторы
Сообщений: 743
Репутация: 11
Статус: Offline
Quote (Pavel)
Не навредит ли это качеству срезов,не будет ли разрывов клеток и ядер?

Может. Могут образоваться кристаллы льда, которые изменят морфологию. Вот поэтому лучше заливать материал в O.C.Т. сразу. O.C.Т. защищает ткань.
После доставки материала, лучше его хранить на -80с.
 
PavelДата: Четверг, 2009-06-11, 0:18 AM | Сообщение # 9
Лейтенант
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Репутация: 0
Статус: Offline
а если постепенно из жидкого азота в -80, а потом в -24 это тоже навредит?
 
PatologoanatomДата: Четверг, 2009-06-11, 0:45 AM | Сообщение # 10
___
Группа: Администраторы
Сообщений: 743
Репутация: 11
Статус: Offline
Это лучшая опция.
 
PavelДата: Четверг, 2009-06-11, 0:48 AM | Сообщение # 11
Лейтенант
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Репутация: 0
Статус: Offline
то есть можно не использовать Optimal Cutting Temperature Compound?
 
PatologoanatomДата: Четверг, 2009-06-11, 1:23 AM | Сообщение # 12
___
Группа: Администраторы
Сообщений: 743
Репутация: 11
Статус: Offline
Не знаю как можно получить качественные срезы, пригодные для ИГХ, на криостате без O.C.T.
 
PavelДата: Четверг, 2009-06-11, 11:20 AM | Сообщение # 13
Лейтенант
Группа: Проверенные
Сообщений: 30
Репутация: 0
Статус: Offline
Скажите, пожалуйста,
1. в каких объемах выпускается О.С.Т.?
2. На сколько образцов органов хватает одного флакона О.С.Т.?
3. Формочки для заливки органов в О.С.Т. специальные ? Как правильно заливать?
4. Приблизительная цена одной единицы О.С.Т.?
5. Есть ли особые требования к О.С.Т. при покупке? То есть это стандартный компонент для ИГХ или надо подбирать?

Добавлено (2009-06-11, 7:54 Am)
---------------------------------------------
Заливать органы О.С.Т. нужно сразу после того как вынимают из жидкого азота? Как правильно провести эту процедуру
Спасибо

Добавлено (2009-06-11, 11:20 Am)
---------------------------------------------
Если можно, укажите, пожалуйста, О.С.Т. какого производителя можно купить

 
Форум » ИММУНОГИСТОХИМИЯ » Технические вопросы » Фиксация органов в жидком азоте
Страница 1 из 11
Поиск: