Фиксация органов в жидком азоте

Pavel

Дата: Среда, 2009-06-10, 10:24 PM | Сообщение # 1

Лейтенант

Группа: Проверенные

Сообщений: 30

Репутация: 0

Статус: Offline

Подскажите, пожалуйста, как правильно проводить заморозку органов в жидком азоте в сосуде Дьюара для иммуногистохимических исследований. Аппарата для програмной заморозки нет.
Спасибо заранее.

Patologoanatom

Дата: Среда, 2009-06-10, 11:52 PM | Сообщение # 2

___

Группа: Администраторы

Сообщений: 755

Репутация: 11

Статус: Offline

Образцы маркируются, заворачиваются в фольгу, помещаются в емкость. В лаборатории применяется криостат.

Pavel

Дата: Среда, 2009-06-10, 11:53 PM | Сообщение # 3

Лейтенант

Группа: Проверенные

Сообщений: 30

Репутация: 0

Статус: Offline

Спасибо большое. А как правильно разморозить органы для нарезки?

Patologoanatom

Дата: Среда, 2009-06-10, 11:55 PM | Сообщение # 4

___

Группа: Администраторы

Сообщений: 755

Репутация: 11

Статус: Offline

Залить в O.C.T.

Pavel

Дата: Среда, 2009-06-10, 11:57 PM | Сообщение # 5

Лейтенант

Группа: Проверенные

Сообщений: 30

Репутация: 0

Статус: Offline

можно ли для заморозки помещать образцы органов в криопробирки?

Добавлено (2009-06-10, 11:57 Pm)
---------------------------------------------
а как расшифровывается О.С.Т.

Patologoanatom

Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:03 AM | Сообщение # 6

___

Группа: Администраторы

Сообщений: 755

Репутация: 11

Статус: Offline

Quote (Pavel)

можно ли для заморозки помещать образцы органов в криопробирки?

Замучаетесь из пробирок выколупывать материал. Предпочтительнее заливать материал в пластиковые формочки в O.C.T. , чтобы быстрее заморозилось можно использовать криоспрей, а затем помещать в контейнер.

Quote (Pavel)

а как расшифровывается О.С.Т.

O.C.T. (Optimal Cutting Temperature) Compound

Pavel

Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:07 AM | Сообщение # 7

Лейтенант

Группа: Проверенные

Сообщений: 30

Репутация: 0

Статус: Offline

А можно ли помещать из жидкого азота органы сразу в криостат при -24? Не навредит ли это качеству срезов,не будет ли разрывов клеток и ядер?

Patologoanatom

Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:15 AM | Сообщение # 8

___

Группа: Администраторы

Сообщений: 755

Репутация: 11

Статус: Offline

Quote (Pavel)

Не навредит ли это качеству срезов,не будет ли разрывов клеток и ядер?

Может. Могут образоваться кристаллы льда, которые изменят морфологию. Вот поэтому лучше заливать материал в O.C.Т. сразу. O.C.Т. защищает ткань.
После доставки материала, лучше его хранить на -80с.

Pavel

Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:18 AM | Сообщение # 9

Лейтенант

Группа: Проверенные

Сообщений: 30

Репутация: 0

Статус: Offline

а если постепенно из жидкого азота в -80, а потом в -24 это тоже навредит?

Patologoanatom

Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:45 AM | Сообщение # 10

___

Группа: Администраторы

Сообщений: 755

Репутация: 11

Статус: Offline

Это лучшая опция.

Pavel

Дата: Четверг, 2009-06-11, 0:48 AM | Сообщение # 11

Лейтенант

Группа: Проверенные

Сообщений: 30

Репутация: 0

Статус: Offline

то есть можно не использовать Optimal Cutting Temperature Compound?

Patologoanatom

Дата: Четверг, 2009-06-11, 1:23 AM | Сообщение # 12

___

Группа: Администраторы

Сообщений: 755

Репутация: 11

Статус: Offline

Не знаю как можно получить качественные срезы, пригодные для ИГХ, на криостате без O.C.T.

Pavel

Дата: Четверг, 2009-06-11, 11:20 AM | Сообщение # 13

Лейтенант

Группа: Проверенные

Сообщений: 30

Репутация: 0

Статус: Offline

Скажите, пожалуйста,
1. в каких объемах выпускается О.С.Т.?
2. На сколько образцов органов хватает одного флакона О.С.Т.?
3. Формочки для заливки органов в О.С.Т. специальные ? Как правильно заливать?
4. Приблизительная цена одной единицы О.С.Т.?
5. Есть ли особые требования к О.С.Т. при покупке? То есть это стандартный компонент для ИГХ или надо подбирать?

Добавлено (2009-06-11, 7:54 Am)
---------------------------------------------
Заливать органы О.С.Т. нужно сразу после того как вынимают из жидкого азота? Как правильно провести эту процедуру
Спасибо

Добавлено (2009-06-11, 11:20 Am)
---------------------------------------------
Если можно, укажите, пожалуйста, О.С.Т. какого производителя можно купить